抗体定制Custom Antibody
027-87561633
甲基化指在DNA甲基转移酶（DNMTs）的作用下将甲基添加在DNA分子中的碱基上，从而影响基因表达的一种常见表观遗传现象。
1、高通量——Illumina甲基化芯片
流程简单，无需进行烦琐的免疫共沉淀，直接检测到发生甲基化的准确位点，而不像其它芯片那样仅检测到发生甲基化的区段。通量高，可一次性检测12份样品，每个样品最多可检测450，000个位点。
 |
2、中通量——高分辨率熔解法（HRM）检测DNA甲基化
HRM是一种最新的遗传学分析手段，具有很高的特异性、稳定性和重复性。
HRM目前的热点应用集中在
- 对未知新突变的扫描、筛查疾病相关突变/SNP扫描、等位基因频率分析；
- 动植物、微生物等物种及品种鉴定；
- DNA指纹、DNA甲基化分析和研究；
- 器官移植的HLA配型；
- 法医学鉴定、亲子鉴定。
实验流程
 |
3、低通量——BSP
针对某一段感兴趣基因上可能的甲基化位点，或还不确切知道其位点的实验，在电泳之后对条带进行克隆测序，从而得到想要的部分片段的测序结果，通过软件分析可以知道该片段甲基化发生的确切位点，测序克隆也可以计算其发生甲基化的频率。
4、技术特点
| Illumina | HRM | BSP |
样品 | 新鲜组织、血液、细胞，石蜡样本等生物材料 | ||
DNA用量 | 500ng甲基化后的DNA | 2ug未甲基化的DNA | 2ug未甲基化的DNA |
通量 | 1-12个样品/slide；每个样品可检测27k和450k个位点 | 1-96-384个样品；每个样品可检测几个位点 | 低通量，位点数少，是甲基化的金标准。 |
数据处理 | 探针注释、相关性分析、热图、与基因表达谱联合分析以及染色体搜索 | 特异熔解曲线 | 测序报告 |
