（一）亚克隆  亚克隆至适当的表达载体 ， 制备大量质粒  ，构建线性化载体。
    （二）表达及评估  将构建好的线性化载体转入合适的寄主菌株中，通过PCR方法确定阳性转化株，表达确认，SDS-PAGE以及Western blot分析。

（三）少量表达及纯化 1L酵母培养物表达，一步法纯化，或附加纯化至纯度最低可达90%。

（四）大规模蛋白制备及纯化 (可选择)。