生物素标记物（Sulfo-NHS-LC-Biotin），用于含有伯氨（NH2-）的蛋白/多肽或者细胞表面蛋白的的标记。

生物素标记的程度取决于蛋白质上氨基的分布、蛋白质浓度和所用试剂的量。实验分析表明，待标记蛋白或抗体的浓度在1mg/mL的时候，需使用20倍蛋白或抗体摩尔数的生物素；而当低于1mg/mL的时候，则需要加入更高摩尔倍数的生物素。以确保蛋白或抗体分子中生物素的掺入水平。

   假如将生物素配置成10mM的浓度（现配现用），用来标记1mL的1mg/mL 的抗体（IgG ，150KD），加入20倍摩尔数的生物素，那么带入公式计算需要加入多少毫摩尔的生物素：

ml protein × (mg protein/ml protein) × (mmol protein/mg protein) × (mmol Biotin/mmol protein) × 20 = mmol Biotin

然后计算需要多少微升10mM的生物素：

 mmol Biotin × (1000000μL/L) × (L/10mmol) = μL Biotin

操作步骤：（本操作步骤按照 1mg抗体的量进行标记） 

1. 取1mg 待标记抗体于超滤管中，并加入相应体积的标记缓冲液（PBS 7.4)，使抗体的终浓度为 2mg/mL。 

2. 加入13.3μL生物素（10mM）溶液和适量标记缓冲液(PBS 7.4)至上述超滤管中，使终体积为 0.5ml，并轻轻吹打混匀。室温孵育 30min。 

3. 加入适量标记缓冲液(PBS 7.4)中透析除盐，3000 g 离心 10min。

4. 加 入等量甘油保存至负20冰箱或三分之二的甘油保存至负40度冰箱中。